Banner

VI NẤM KHẲNG ĐỊNH

(Cập nhật: 27/11/2017)

VI NẤM KHẲNG ĐỊNH

I. MỤC ĐÍCH, NGUYÊN LÝ

1. Mục đích

Xác định vi nấm gây bệnh

2. Nguyên lý

Nuôi cấy, định danh vi nấm dựa trên các tính chất về hình thể, cấu tạo, bắt màu và một số tính chất sinh vật, hóa học của nấm.

II. CHUẨN BỊ

1.Người thực hiện

- Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Trưởng khoa, phó khoa, Cán bộ có trình độ đại học trở lên

- Cán bộ quản lý chất lượng, tổ trưởng chuyên môn chịu trách nhiệm giám sát việc tuân thủ quy trình

2.Phương tiện, hóa chất

Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.

Trang thiết bị

-   Kính hiển vi

-   Tủ an toàn sinh học cấp 2

- Máy ly tâm. - Tủ ấm.

-   Máy tính cài phần mềm đọc API( nếu có).

Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

 

 

ĐƠN

SỐ

STT

Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao

VỊ

LƯỢNG

1

Lọ lấy bệnh phẩm

Lọ

1,000

2

Que cấy

Cái

2,000

3

Lam kính

Cái

2,000

4

Lá kính

Cái

2,000

5

Lactophenol Coton Blue

ml

1,000

6

Nước muối sinh lý

ml

5,000

7

KOH 20 %

ml

5,000

8

Mực tàu

ml

0,500

9

Sabouraud

Đĩa

1,000

10

Candiselect

Đĩa

0,500

11

Giá đường API 20C AUX

Test

1,000

12

RAT

Ống

1,000

13

Bông

Kg

0,001

14

Cồn 90 độ (vệ sinh dụng cụ)

ml

10,000

15

Đèn cồn

Cái

0,0001

16

Panh

Cái

0,0001

17

Khay đựng bệnh phẩm

Cái

0,0001

18

Hộp vận chuyển bệnh phẩm

Cái

0,0001

19

Cái

0,020

20

Khẩu trang

Cái

0,020

21

Găng tay

Đôi

3,000

22

Găng tay xử lý dụng cụ

Đôi

0,020

23

Quần áo bảo hộ

Bộ

0,001

24

Axit ngâm lam

ml

10,000

25

Ống nghiệm thủy tinh

Ống

1,000

26

Bút viết kính

Cái

0,00

27

Bút bi

Cái

0,010

28

Bật lửa

Cái

0,010

29

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

Tờ

0,001

30

Cồn sát trùng tay nhanh

ml

1,000

31

Dung dịch nước rửa tay

ml

8,000

32

Khăn lau tay

Cái

0,030

33

Giấy trả kết quả xét nghiệm

Tờ

2,000

 

3.Bệnh phẩm

Máu, dịch, mủ, đờm, phân, nước tiểu, da, tóc, móng.

4.Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu

III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

1. Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh

2. Tiến hành kỹ thuật

2.1. Nuôi cấy nấm trên môi trường Sabouraud ủ ấm ở nhiệt độ 30°C.

-        Bệnh phẩm là da, tóc, móng: Cắt nhỏ bệnh phẩm cấy 6- 8 điểm trên đĩa

Sabouraud.

-        Bệnh  phẩm  là  các  chất  dịch:  Hút  3-  5  giọt  dịch  cấy  dàn  trên  đĩa

Sabouraud.

-        Bệnh phẩm là nước tiểu: Sử dụng kỹ thuật cấy định lượng.

2.2. Soi tươi tìm nấm: Đánh giá sơ bộ.

2.3. Đọc kết quả hàng ngày

IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Quan sát hình thể cấu tạo, tính chất, màu sắc khuẩn lạc. + Khuẩn lạc nấm men

Khuẩn lạc Candida có dạng trơn, nhẵn màu kem thường mọc nhanh sau

24giờ.

Khuẩn lạc Cryptococcus trơn nhẵn màu be( khô hơn so với nấm Candida) mọc chậm thường sau 48giờ.

+       Khuẩn lạc nấm mốc:

Aspergillus màu sắc khuẩn lạc khác nhau.

P. marneffei :sinh sắc tố màu đỏ nâu đến đỏ rượu vang khuếch tán vào môitrường khi nuôi cấy ở nhiệt độ phòng.

- Quan sát kính hiển vi sau cấy:

Tế bào nấm men hình tròn hoặc bầu dục ( đối với nấm Candida), nẩy chồi hoặc không. Cryptococcus thường hình tròn, kích thước lớn.

Định danh loài nấm men:

Định danh sơ bộ 4 loài nấm men tiến hành nuôi cấy vào môi trường

Candida select.

+ Định danh nấm men bằng bộ API 20C AUX. Trả kết quả loài nấm theo kết quả định danh.

Định danh nấm mốc:

Làm tiêu bản bằng Lactophenol Coton Blue.

Dựa vào hình thái, màu sắc khuẩn lạc, dựa vào đặc điểm vi thể của từng loài Aspergillus để kết luận loài.

P. marneffei : Trênmôi trường Sabouraud khuẩn lạc mọc nhanh, kiểu dalộn cho đến có dạng phủ đầy lông tơ, sinh sắc tố màu đỏ nâu đến đỏ rượu vang khuếch tán vào môi trường.

Âm tính: Không thấy khuẩn lạc mọc sau 4 ngày trả kết quả sơ bộ : Âm tính.

Các đĩa cấy được bỏ sau 7 ngày nuôi cấy.

V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

Để định danh nấm men bằng bộ API 20C AUX cho kết quả chính xác khi lấy khuẩn lạc nấm phải thuần( khuẩn lạc riêng rẽ) tránh bị lẫn .

(Lượt đọc: 942)

Tin tức liên quan

  • Cấp cứu 115
  • Đường dây nóng
  • 5 nhiệm vụ trọng tâm 2019
  • Học tập làm theo lời bác
  • Chương trình mục tiêu quốc gia
  • Đại hội đảng
  • Lịch công tác
  • Hình ảnh hoạt động
  • Câu lạc bộ Tim mạch
  • Câu lạc bộ Tiểu đường
  • Câu lạc bộ Hen - COPD
  • Liên kết web
    • Bộ Y Tế
    • Báo Quảng Ninh
    • Sở Y tế Quảng Ninh
    • Báo cáo hoạt động khám chữa bệnh
    • Bệnh viện Bãi Cháy
    • Bệnh viện Sản nhi Quảng Ninh
    • CDC
    • Chi cục An toàn vệ sinh thực phẩm
    • Bệnh viện Cẩm phả
    • Bệnh viện Đa khoa khuc vực Cẩm phả
    • Bệnh viện Lao và phổi
    • Bệnh viện Phục hồi chức năng Quảng Ninh
    • Bệnh viện Việt Nam Thụy Điển Uông Bí
    • Bệnh viện Y dược cổ truyền Quảng Ninh
    • Trung tâm y tế Hạ Long
    • Trung tâm Y tế huyện Ba Chẽ
    • Trung tâm Y tế huyện Bình Liêu
    • Trung tâm Y tế huyện Đầm Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hải Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hoành Bồ
    • Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên
    • Trung tâm Y tế huyện Vân Đồn
    • Trung tâm Y tế Thành phố Cẩm Phả
    • Trung tâm Y tế Thành phố Móng Cái
    • Trung tâm Y tế Thành phố Uông Bí
    • Trung tâm Y tế thị xã Đông Triều
    • Trung tâm Y tế thị xã Quảng Yên
    • Bệnh viện 108
    • Trung tâm DI & ADR quốc gia
    • Bệnh viện Bạch Mai
    • Bệnh viện Đa khoa tỉnh Phú Thọ
    • Bệnh viện Việt Đức
    • Sở Y tế tỉnh Phú Thọ