Banner

HCV Ag/Ab MIỄN DỊCH BÁN TỰ ĐỘNG

(Cập nhật: 27/11/2017)

HCV Ag/Ab MIỄN DỊCH BÁN TỰ ĐỘNG

I. MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

1. Mục đích: Phát hiện kháng nguyên, kháng thể HCV Ag/Ab trong máu.

2. Nguyên lý: Dựa trên nguyên lý của kỹ thuật ELISA (miễn dịch gắn enzym) (VD).

II. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

- Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Trưởng khoa, phó khoa, Cán bộ có trình độ đại học trở lên

- Cán bộ quản lý chất lượng, tổ trưởng chuyên môn chịu trách nhiệm giám sát việc tuân thủ quy trình

2. Phương tiện, hóa chất

Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.

2.1.Trang thiết bị

-  Dàn máy ELISA.

-  Máy ly tâm thường.

-  Tủ âm sâu (-200C) (nếu có).

-  Tủ lạnh 20C - 80C

-  Micropipet vi lượng 100µl, 1000 µl.

-  Giá đựng ống máu

-  Bộ pipetman 8 kênh (nếu có).

-  Ống đong có vạch dung tích 25ml, 100ml, 1000ml

2.2.Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

Định mức sinh phẩm và vật tư tiêu hao cho 20 mẫu/lần thực hiện (VD)

STT

Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao

Đơn vị

Số lượng

1

Bông

Kg

0,001

2

Dây garô

Cái

0,001

3

Tube đựng bệnh phẩm

Cái

1,000

4

Sinh phẩm chẩn đoán

Test

1,000

5

Khấu hao sinh phẩm cho chạy chứng, kiểm tra

 

 

 

chất lượng

Test

0,200

6

Chứng ngoại kiểm âm (nếu có)

ml

0,030

7

Chứng ngoại kiểm dương (nếu có)

ml

0,030

8

Ngoại kiểm (nếu có)*

 

0,020

9

Nước cất

ml

2,000

10

Đầu côn 1000 µl

Cái

1,000

11

Đầu côn 200 µl

Cái

1,050

12

Giấy thấm

Cuộn

0,100

13

Giấy xét nghiệm

Tờ

2,000

14

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

Tờ

0,001

15

Bút viết kính

Cái

0,020

16

Bút bi

Cái

0,010

17

Cái

0,020

18

Khẩu trang

Cái

0,020

19

Găng tay

Đôi

0,100

20

Găng tay xử lý dụng cụ

Đôi

0,020

21

Quần áo bảo hộ

Bộ

0,005

22

Dung dịch nước rửa tay

ml

8,000

23

Cồn sát trùng tay nhanh

ml

1,000

24

Dung dịch khử trùng

ml

10,000

25

Khăn lau tay

Cái

0,010

 

* Ghi chú: Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/50 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).

3. Bệnh phẩm

Huyết thanh hoặc huyết tương của người bệnh

4. Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu

III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

1. Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh

Từ chối những bệnh phẩm không đạt yêu cầu

2. Tiến hành kỹ thuật

Bộ sinh phẩm MONOLISA HCV Ag-Ab ULTRA Bio-Rad (VD)

 

 

Các bước

Xét nghiệm định tính Anti HCV

 

1

Chuẩn bị sinh phẩm, sơ đồ nhỏ mẫu

 

2

Nhỏ dung dịch cộng hợp 1

 

3

Nhỏ chứng và bệnh phẩm hoặc mẫu ngoại kiểm (nếu có) theo

 

 

thứ tự hướng dẫn.

 

4

Đậy tấm phản ứng và ủ ở nhiệt độ và trong thời gian quy định

 

 

theo quy trình hướng dẫn của nhà sản xuất

 

5

Rửa tấm phản ứng bằng chương trình theo quy trình hướng dẫn

 

 

của nhà sản xuất

 

6

Nhỏ dung dịch cộng hợp 2 vào các giếng theo hướng dẫn.

 

7

ủ ở nhiệt độ và thời gian theo hướng dẫn.

 

8

Rửa phiến nhựa và làm khô

 

9

Pha dung dịch cơ chất và nhỏ vào mỗi giếng.

 

 

Để tấm phản ứng trong tối theo quy trình ở nhiệt độ phòng

 

 

(180C – 300C) trong thời gian như hướng dẫn của nhà sản xuất.

 

10

Dừng phản ứng

 

11

Đọc KQ ở bước sóng 450/620 -700 nm bằng máy đo mật độ

 

 

quang.

       

 

IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

1. Điều kiện

-  PC Ab: Độ hấp phụ của chứng dương Ab

-  PC Ag: Độ hấp phụ của chứng dương Ag

-  PCx: Giá trị OD trung bình của chứng dương Ab

-  CO: Giá trị ngưỡng

Tổng số OD của chứng dương

PCx =

3

NC < 0,6 x CO

0.800 ≤ PC Ab ≤ 2.400

PC Ag > 0,500

Loại chứng dương PC có giá trị cao hơn 30% so với giá trị PCx. Tiếp tục tính kết quả theo 2 chứng dương còn lại.

     PCx

CO =

       4

 

2.Nhận định, trả lời kết quả

-  Mẫu huyết thanh:

-  Mẫu huyết thanh có OD < CO được coi là âm tính.

-  Cần thận trọng trong trường hợp mẫu huyết thanh có CO -10% < OD<CO. Trường hợp này phải được xét nghiệm lại .

-  Mẫu huyết thanh có OD≥ CO cần được xét nghiệm lại.

-  Nếu lần 2 hoặc lần 3 có OD≥ CO,  mẫu được coi là dương tính.

-  Nếu 2 lần đều có OD < CO, mẫu được coi là âm tính

V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

1. Sai sót

-  Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả hoặc dương tính giả, thông thường do:

-  Thực hiện sai các bước trong quy trình hướng dẫn.

-  Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo bởi huyết thanh/ huyết tương có nồng độ kháng thể cao.

-  Cơ chất bị nhiễm bởi các tác nhân oxy hoá (thuốc tẩy, ion kim loại v.v…) ,

-  Dung dịch dừng phản ứng bị nhiễm bẩn.

2. Xử trí

-                     Tuân thủ đúng các bước quy trình hướng dẫn của nhà sản xuất và hướng dẫn về độ ổn định hóa chất xét nghiệm trong bộ sinh phẩm sử dụng.

-                     Kiểm tra và vệ sinh máy rửa thường xuyên trước và sau khi làm xét nghiệm

-                     Chia hóa chất (chất cộng hợp, dung dịch hiện màu và dừng phản ứng) vào ống nghiệm sạch trước mỗi lần nhỏ.

(Lượt đọc: 1291)

Tin tức liên quan

  • Cấp cứu 115
  • Đường dây nóng
  • 5 nhiệm vụ trọng tâm 2019
  • Học tập làm theo lời bác
  • Chương trình mục tiêu quốc gia
  • Đại hội đảng
  • Lịch công tác
  • Hình ảnh hoạt động
  • Câu lạc bộ Tim mạch
  • Câu lạc bộ Tiểu đường
  • Câu lạc bộ Hen - COPD
  • Liên kết web
    • Bộ Y Tế
    • Báo Quảng Ninh
    • Sở Y tế Quảng Ninh
    • Báo cáo hoạt động khám chữa bệnh
    • Bệnh viện Bãi Cháy
    • Bệnh viện Sản nhi Quảng Ninh
    • CDC
    • Chi cục An toàn vệ sinh thực phẩm
    • Bệnh viện Cẩm phả
    • Bệnh viện Đa khoa khuc vực Cẩm phả
    • Bệnh viện Lao và phổi
    • Bệnh viện Phục hồi chức năng Quảng Ninh
    • Bệnh viện Việt Nam Thụy Điển Uông Bí
    • Bệnh viện Y dược cổ truyền Quảng Ninh
    • Trung tâm y tế Hạ Long
    • Trung tâm Y tế huyện Ba Chẽ
    • Trung tâm Y tế huyện Bình Liêu
    • Trung tâm Y tế huyện Đầm Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hải Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hoành Bồ
    • Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên
    • Trung tâm Y tế huyện Vân Đồn
    • Trung tâm Y tế Thành phố Cẩm Phả
    • Trung tâm Y tế Thành phố Móng Cái
    • Trung tâm Y tế Thành phố Uông Bí
    • Trung tâm Y tế thị xã Đông Triều
    • Trung tâm Y tế thị xã Quảng Yên
    • Bệnh viện 108
    • Trung tâm DI & ADR quốc gia
    • Bệnh viện Bạch Mai
    • Bệnh viện Đa khoa tỉnh Phú Thọ
    • Bệnh viện Việt Đức
    • Sở Y tế tỉnh Phú Thọ